中药活性成分结构复杂、类型多样、含量低、不稳定,因此分离纯化较为困难,目前主要依赖于硅胶柱色谱、大孔吸附树脂柱色谱、聚酞胺柱色谱、凝胶柱色谱、高效逆流色谱、制备型高效液相色谱等色谱技术。为了得到纯度高的活性成分,需经多种溶剂萃取和反复柱色谱,不仅溶剂消耗量大、环境污染严重,而且效率和收率也较低。
近年来,一种以与目标分子具有高度识别的分子印迹聚合物(MIPs)为固定相进行的色谱分离技术——分子印迹技术(MIT)在中药活性成分分离纯化中的应用研究广泛展开,涉及黄酮、多元酚、生物碱、甾体、香豆素等多种结构类型的化合物。这些研究均取得了较好的效果,为在生产实践中推广该技术提供了依据。
■现状:MIT分离中药研究逐步展开
目前,有关MIT在药学领域的文献半数以上涉及手性物的分离和分析,而其在中药活性成分的分离纯化中的应用虽然还不是很多,但都收到了较好的效果。
黄酮:目前所报道的利用MIT分离纯化的黄酮类化合物多以槲皮素为模板、丙烯酞胺为功能单体。例如,北京大学化学与分子工程学院的谢建春等首先将槲皮素MIPs直接用于银杏叶提取物水解液的分离,得到了槲皮素和与其结构相似的山柰酚,其中槲皮素的回收率为89%,从而证明了利用MIPs直接从中药中获得具有相同药效的化合物的可能性。Zhu等则以槲皮素为模板制备的MIPs作为固相萃取材料,筛选到了藏药缘毛锦鸡儿中两个活性比槲皮素强的表皮生长因子受体抑制剂:(E)-piceatannol和butein,两者回收率分别为80%和76%。
此外,谢建春等还以2,2-羟甲基丁醇三甲基丙烯酯(TRIM)为交联剂制备了槲皮素MIPs,将其用于分子印迹固相萃取(MIP-SPE),从服用了银杏叶提取物水解液的大鼠血浆中分离并测定出槲皮素和异鼠李素,表明该MIP-SPE能有效洁净水溶性生物样品,并直接进行定量测定。
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