好的维持力,存在于细胞壁内的灵芝多糖较难渗出。于淑娟等人在国内外率先采用超声波的高频振荡及其产生的“空化效应”能破除这种维持力,使灵芝子实体的结构层发生变化,并除去一部分影响酶接触纤维的妨碍物,从而提高纤维素酶水解纤维素的水解效率,扩大透析膜孔径,尽快释放细胞壁多糖。 与其他方法比较发现超声波催化纤维素酶法提取得到的固形物含量和灵芝多糖含量均很理想。目前这些方法都还处于试验研究阶段,更进一步的研究报道尚未见到,距离实现产业化还有一定的差距。 2.2灵芝多糖的分离纯化与结构分析 虽然灵芝多糖体的效用明确,但它的抗病的作用机理仍不很清楚,但其结构及分子量对其活性作用效果是很明显的,多糖的活性与其聚合度及分子量有关,同一种活性多糖也是在分子量较高的片段活性较强,还与其溶解度、粘度等理化性质有关,一般水溶性的葡聚糖生物活性较高。在日本及美国,近几年有采用经生物酶处理来纯化粗多糖’&(,纯度可以达到很高,但有资料表明,多糖活性与其某些特定的基团有关,而酶处理如蛋白酶的应用就会对一些特殊的蛋白基团造成破坏,导致多糖活性下降。所以进行灵芝多糖的结构分析对于搞清楚它的抗病的作用机理是非常有意义的。 测定灵芝多糖分子量时,由于粗多糖中常含有色素、低聚糖、蛋白等杂质,为了避免因存在杂质影响测定结果,需要把检样适当提纯,采用如下提纯工艺:粗多糖!脱色!脱蛋白!柱层析及色谱分离!纯多糖。目前一般用Savage法和蛋白酶法结合除去蛋白,用20%的H2O2进行脱色。 多糖的结构分析方法较多,包括物理学的方法———红外光谱、核磁共振等,化学的方法———甲基化反应、部分酸水解等,生物学的方法———工具酶应用、免疫学方法等。但要得到诸如:糖链的分子量、糖基组成、糖苷键所取的α-或β-异头异构形式等结构信息,不是一种技术或方法所能做到的,必须从各种技术方法的选择使用和巧妙配合中,得到来自各个角度的信息和数据,从而分析出多糖的结构。 有报道表明,目前已分离到200多种灵芝多糖,它们在单糖组成、糖苷键构型、分子量、旋光度、溶解上一页 [1] [2] [3] [4] [5] 下一页 |
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