式。通过中药色谱指纹图谱相似度评价系统软件(国家药典委员会) , 计算各样品与共有模式间的相似度, 见表2、3,组成共有模式的色谱叠加图见图3。而第1 类1、4、8号样品的色谱图(见图1) , 与共有模式的指纹图谱比较, 各共有峰基本都存在, 但各色谱峰之间的相对峰面积不同, 由此可以看出它们之间的内在质量存在一定的差异。所以, 指纹图谱正是通过种内在的差异, 达到控制不同批次、不同产地的药材。
3 讨论
3.1 通过对一系列提取方法(超声、索氏、回流提取)、不同的提取溶液和提取时间的考察以及结合有关文献确定了以上供试品溶液的制备方法。
3.2 采用二级管阵列检测器对指纹图谱的检测波长进行了选择, 从190～ 400 nm 内先选出220、254、290、310、330 nm 分离度较好的波长, 分析比较各波长下指纹图谱, 发现检测波长为254 nm 时色谱图所包含的信息量最大, 且各色谱峰分离较好。
3.3 采用HPLC 梯度洗脱法对毛脉酸模药材进行了指纹图谱的研究, 实验证明, 该方法可操作性强、重现性好, 可作为毛脉酸模药材指纹图谱研究的基础。
3.4 按本方法建立的由9 批药材构成的共有模式图和1、4、8 号样品色谱图相比较, 构成共有模式9批样品的相似度较高, 均在90% 以上, 而1、4、8 号样品的相似度均低于90%。从图1 可以看出, 两类毛脉酸模样品差异主要集中在10、15、26、28、29 号峰的峰形及其相对高度上, 构成共有模式样品的色谱指纹图谱中10、15 号峰明显较高, 经研究是蒽醌苷类成分。在第1 类的4 号(桃山跃进)、8 号(尚志市帽儿山) 样品中15、26、28、29 号峰较高, 其中28号峰(大黄素)、29 号峰(大黄酚) 为蒽醌苷元类成分; 在1 号(大兴安岭新林) 样品中26、28、29 号峰的峰位高, 其中26 号峰(酸模素) 的相对高度较其他样品均高, 可能与1 号样品采于水湿洼地有关,故怀疑酸模素的积累可能受水分的影响较大, 具体影响过程有待进一步研究。
3.5 本实验先对所有样品进行聚类分析, 然后选择好的一类样品来建立共有模式, 并将整个色谱图导入中药色谱指纹图谱相似度评价系统软件, 生成共有模式, 计算相似度。结果表明, 相似度分析结果与系统聚类结果一致, 两种方法得到了相互验证上一页 [1] [2] [3] [4] [5] 下一页 |
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