同时间点采集的色谱峰相似度分别为0.996、0.992、0.983、0.996、0.995、0.999、0.998, 说明供试品溶液在24 h 内稳定性较好。
2.6 样品测定: 将不同树龄银杏叶在不同采收期采集的35 批样品分别制备供试品溶液, 进样20 μL ,按选定的HPLC 色谱条件分析测定, 采集60 m in的数据, 并将采集的数据导出, 供计算机辅助相似性评价系统进行评价。
2.7 应用计算机辅助相似性评价系进行数据处理:将采集的数据导入中药指纹图谱相似度计算软件(V er 1. 315, 中南大学中药现代化研究中心研制) ,经数据剪切、等长处理、数据平移, 然后将谱峰进行自动匹配, 接着进行全谱相似度分析。求出各谱峰的共有模式(同-1树龄的银杏叶不同采收期指纹图谱共有模式图和同-1采收期不同树龄的银杏叶指纹图谱共有模式图各选出1 张代表性图谱, 见图1、2) 及各谱峰与共有模式比较的相似度, 结果见表1、2。
2.8 结果
2.8.1 由表1 可以看出, 同-1树龄不同采收期的银杏叶相似度评价中, 二至四年生银杏叶不同采收期样品指纹图谱相似度较高(大于0.90) ; 五年生和六年生银杏叶不同采收期样品指纹图谱相似度变化范围较大(0.86～ 0.97)。提示二至四年生银杏叶分别在5～ 10 月不同的生长期所含成分虽然有差异,但成分的组成和比例有较好的-1致性; 五年生和六年生银杏叶分别在5～ 10 月份不同的生长期成分的组成和比例有-1定的变化。
2.8.2 由表2 可以看出, 同-1采收期不同树龄的银杏叶指纹图谱相似度评价中, 5～ 7 月不同树龄银杏叶指纹图谱相似度较高(大于0.90) ; 8～ 10 月不同树龄银杏叶指纹图谱相似度变化范围较大(0.84～0.99)。提示不同树龄银杏叶分别在5～ 7 月所含成分的组成和比例有较好的-1致性, 8～ 10 月所含成分的组成和比例有-1定的变化。鉴于邳州银杏叶生产基地药农传统采药时间为8 月底到9 月初, 为了保证所采集银杏叶质量有较好的-1致性, 建议采叶时间提前到7 月份。
3 讨论
3.1 银杏叶高效液相色谱图可分离出90 多个峰,如果按照国家药典委员会关于“中药注射剂指纹图谱研究的技术要求(暂行) 的通知”进行谱峰分析, 计算共有峰相对保留时间和相对峰面上一页 [1] [2] [3] [4] [5] 下一页 |
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