HPLC-DAD)所得数据为三维数据,即数据同时包含了光谱与色谱信息。光谱能提供化学物质的大量定性信息,而色谱曲线能提供定量信息。当然,如果条件控制得好,化学物质的保留时间对化学物质的定性也是很有帮助的,但是,在指纹图谱研究中,由于样本量大,很难实现样本之间的完全无漂移或其他问题,而联用仪产生的三维数据中的光谱信息则为指纹图谱研究提供了新的信息。
样本2的色谱流出曲线,其中包含17个峰,甜菜碱提取物色谱峰中12 个峰的紫外光谱,这为甜菜碱的定性工作提供了有利的依据。
2. 2 类胡萝卜素提取液的指纹图谱分析
检测波长为456nm 时,3个枸杞样本的类胡萝卜素提取液的色谱图可见,3个样本的类胡萝卜素提取液的色谱图很相似,根据本实验室的中药指纹图谱相似性软件计算,其相似性大于90%。可以认为这7个峰是枸杞的共有峰和特征峰,因此,可将枸杞类胡萝卜素提取物的HPLC 图作为指纹图谱进行药材真伪的鉴定。
以样本1为例,类胡萝卜素提取液的色谱;分离后的类胡萝卜素提取液的每个峰的紫外光谱。
3 讨 论
从枸杞2种提取方法所得的色谱指纹图谱来看,枸杞类胡萝卜素提取液分析所得的指纹图谱之间差异很小,说明采用这种提取方法能找出枸杞的特征性峰,为有效鉴别样品的真伪提供了一定的依据;另外,在指纹图谱研究的初级阶段,需建立药材的不同种属间药材指纹图谱共有模式。可以看出,枸杞的共有峰很明显,因此,采用这种方法建立共有模式较容易。而枸杞甜菜提取液各样品的指纹图谱差异很大,它正好反映出枸杞各种属之间的差异。因此,用甜菜碱提取液对枸杞进行种属的鉴定比用类胡萝卜素提取液对枸杞进行种属鉴定合适。由图可看出,用甜菜碱提取液指纹图谱要建立一个枸杞指纹图谱的共有模式是非常困难的。尤其在相对样本数不多或缺乏必要的数据积累的情况下,通过建立共有模式,制定合理的相似性标准,对甜菜碱提取液进行分析,会引起相
当大的误差,而采用类胡萝卜素提取液的指纹图谱相对合理。
从枸杞指纹图谱的研究来看,采用一种固定的提取方法和分析方法进行指纹图谱的研究存在一定的缺陷。因为采用不同提取方法所得到的指纹图谱可能从不同侧面反映该药材的特征,从而构成其全貌,且其中每一张指纹图谱都有其相应的特征。而1张指纹图谱一般很难反映一个药材的整体特征,不能解决研究中碰到的一系列问题。
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