摘要:目的:介绍DNA指纹图谱技术,阐述其在中药研究中的作用。方法:综合介绍建立DNA指纹图谱的一般技术步骤,结合近年来国内外在方面的研究,探讨其在中药有关领域的应用。结论:作为中药指纹图谱的一组成部分,DNA 指纹图谱这一现代分子生物学技术在现代中药研究中有其独特的作用,应用于中药研究的DNA指纹技术有RFLP、PCR、RAPD、PCR-RFLP、RAPD-RFLP、AFLP 等。DNA指纹图谱技术在药材鉴别、GAP实施、道地药材研究、遗传育种和种质资源研究及中成药质量控制等领域有重要价值和广阔的应用前景。
关键词:DNA 指纹图谱;中药研究;中药鉴别;GAP;遗传育种
从20 世纪50年代DNA双螺旋学说的提出到60年代基因学说的出现,从70年代DNA限制性内切酶的发现到80年代PCR技术的出现,分子生物学发展迅猛。基因工程等生物新技术的不断出现和发展,为人们研究解决问题提供了新的思路和方法。分子生物学技术迅速被应用到医学、农学、分类学、法医学等许多领域,并取得了巨大成就。近年来,中医药工作者将分子生物学理论和技术引入到自己的研究领域,并取得了令人瞩目的成果,对中医药学的现代化进程产生了积极的推动作用。
1 DNA 指纹图谱的概念
核苷酸序列是生命有机体构建、维持和繁殖生命所必需的遗传信息。不同种生物体含有不同的DNA序列,同种生物体既有相同的DNA序列,保持同种生物体的遗传性状,又具有多态性,这种多态性可以是个体、种属或变异等引起的,它使得同种生物中的各个体千差万别,生物多样性正是由于其基因多态性的结果。由于这种核苷酸序列是相对稳定的,因而可以利用现代分子生物学技术构建DNA指纹图。如将生物体DNA模板进行PCR扩增,不同生物体得到的DNA 片段的大小、数目不同,再将这种扩增产物进行琼脂糖凝胶电泳,电泳结果显示的DNA 带型差异在紫外下成像,从而得到DNA指纹图。DNA指纹图谱具有高度的个体特异性。在分子水平上检测基因多态性,比形态、组织和化学水平上检测能代表其变异类的遗传标记,其鉴别结果更加准确可靠。DNA指纹技术灵敏度高,如果选择合适的扩增引物,其结果的重复性也非常好。
2 DNA 指纹图谱的建立
国外在70 年代发展起来的DNA片断分析技术——限制性内切酶片段长度多态性标记( Restr[1] [2] [3] [4] [5] 下一页 |
|
|
|
| 文章为中药网整理,或来自网络,内容仅供访问者参考, 版权归原作者所有 , 转载请注明出处！互动交流请进中药论坛！ |
相 关 文 章
