关键词：薄层扫描； 高效液相色谱； 川芎； 黄芪； 阿魏酸； 黄芪甲甙； 正交试验
中图分类号：R284.2 文献标识码：A 文章编号：1008-0805(2000)10-0883-01Orthogonal Optimization of Extracting Technology for Shuguan CapsulesZHOU Qin-wen, SUN Xiao-fang
(Tongrentang Chinese Medicine Factory, Nanjing 210012, China)TLCS and HPLC methods are used in orthogonal optimization of Shuguan Capsules extraction. The results show that the best condition is adding 6 times of 70% alcohol, reflux-extracting for 3 times and 3 hours per pass.
Key words:TLCS; HPLC; Rhizoma Chuanxiong; Radix Astragali; Ferulic acid; Astragaloside I; Orthogonal design2 实验方法
2.1 正交试验设计：根据预试验，川芎、黄芪等系醇回流方法提取，考虑到醇回流工艺与醇浓度，加醇数量，提取时间，提取次数等因素有关，设计了四因素三水平正交试验(表1，表2)。 Abstract: 舒冠胶囊由川芎等数味中药组成，具有益气活血，行气止痛功效，临床用于治疗冠心病，心绞痛等疾病，疗效显著。根据预试验，方中川芎、黄芪采用醇回流提取，本文用正交试验法优选醇回流的工艺参数。
1 仪器与试药
Waters 996型高效液相色谱仪；510泵，996型二级管阵列检测器；Millennium 2010色谱管理系统；岛津Cs-9000型双波长薄层扫描仪。
对照品：黄芪甲甙、阿魏酸，由中国药品生物制品检定所提供；试剂均为分析纯。
表1 因素水平表
| 水平 | 乙醇浓度A(%) | 加乙醇B倍数 | 时间C/h | 提取次数D |
| 1 | 50 | 4 | 1 | 1 |
| 2 | 70 | 6 | 2 | 2 |
| 3 | 90 | 8 | 3 | 3 |
2.3 样品测定
2.3.1 黄芪甲甙的含量测定：精密吸取样品溶液20 ml，挥去乙醇，加水溶解，用水饱和的正丁醇萃取，合并正丁醇液，以3倍量按试液洗涤，回收正丁醇，残渣加甲醇2 ml溶解，作为供试品溶液。取黄芪甲甙对照品，加甲醇配制成每1 ml含1 mg的对照品溶液，分别精密吸取对照品4.8 μl与供试品4 μl，点于硅胶G薄层板上，以氯仿∶甲醇∶水(65∶35∶10)的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇液，加热至颜色清晰，覆盖一同样大小玻璃板，以λS=510 nm，λR=610 nm扫描，计算含量，结果列于表2。
2.3.2 阿魏酸的测定：参照文献［1］测定，结果列于表2。
2.3.3 川芎中荧光成分的测定：取川芎对照药材0.5 g，用乙醇回流提取定容至5 ml，精密吸取正交试验样品溶液与川芎药材液各1 μl，点样于硅胶G板上，以正己烷-醋酸乙酯(4∶1)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外灯(365 nm)下检视(图1)，以λS=335 nm，λR=200 nm扫描，计算荧光斑点面积，结果列于表2。
| 序号 | 因素 | 川芎荧光 成分面积 A/×104mm2 |
阿魏酸 C/μg*ml-1 |
黄芪甲甙 含量(%) |
||||
| A | B | C | D | |||||
| 1 | 1 | 1 | 1 | 1 | 1.60 | 105 | 1.49 | |
| 2 | 1 | 2 | 2 | 2 | 3.25 | 140 | 3.20 | |
| 3 | 1 | 3 | 3 | 3 | 3.48 | 154 | 3.83 | |
| 4 | 2 | 1 | 2 | 3 | 3.06 | 181 | 4.46 | |
| 5 | 2 | 2 | 3 | 1 | 2.71 | 165 | 3.52 | |
| 6 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3.78 | 179 | 3.19 | |
| 7 | 3 | 1 | 3 | 2 | 3.91 | 182 | 4.12 | |
| 8 | 3 | 2 | 1 | 3 | 4.08 | 139 | 4.68 | |
| 9 | 3 | 3 | 2 | 1 | 2.42 | 123 | 3.96 | |
川 芎 荧 光 成 分 |
K1 | 8.33 | 9.47 | 9.46 | 6.73 | |||
| K2 | 10.45 | 10.04 | 9.63 | 10.94 | ||||
| K3 | 10.41 | 9.68 | 10.12 | 11.52 | ||||
| RX3 | 2.12 | 0.57 | 0.64 | 4.79 | ||||
阿 魏 酸 |
K1 | 399 | 468 | 423 | 393 | |||
| K2 | 525 | 444 | 444 | 501 | ||||
| K3 | 444 | 456 | 501 | 474 | ||||
| RX3 | 126 | 24 | 88 | 108 | ||||
黄 芪 甲 甙 |
K1 | 8.52 | 10.07 | 9.36 | 8.97 | |||
| K2 | 11.17 | 11.40 | 11.62 | 10.35 | ||||
| K3 | 12.76 | 10.98 | 11.47 | 12.97 | ||||
| RX3 | 4.24 | 1.33 | 2.26 | 4.00 | ||||
2.5 正交试验结果的综合分析：根据直观分析结果，A和D为主要因素，B和C为次要因素，但就不同成分而言，最佳组合不一样，分别将川芎荧光成分面积、阿魏酸含量、黄芪甲甙最大值量化为100，其它以此折算计分，合并综合评价，结果列于表3。 表3 正交试验结果综合分析
| 序号 | 因素 | 川芎荧 光成分 |
阿魏酸 | 黄芪 甲甙 |
综合分 | |||
| A | B | C | D | |||||
| 1 | 39.2 | 57.7 | 31.8 | 128.7 | ||||
| 2 | 79.6 | 76.9 | 68.4 | 224.9 | ||||
| 3 | 85.2 | 84.6 | 81.9 | 251.7 | ||||
| 4 | 97.0 | 99.4 | 95.2 | 291.6 | ||||
| 5 | 66.4 | 90.6 | 75.1 | 232.1 | ||||
| 6 | 92.6 | 98.3 | 68.1 | 259.0 | ||||
| 7 | 95.8 | 100.0 | 88.0 | 283.8 | ||||
| 8 | 100.0 | 76.3 | 100.0 | 276.3 | ||||
| 9 | 59.3 | 67.5 | 84.7 | 211.5 | ||||
| K1 | 605.3 | 704.1 | 664.0 | 572.3 | ||||
| K2 | 782.7 | 733.3 | 728.0 | 767.7 | ∑ Y=2 159.6 | |||
| K3 | 771.6 | 722.2 | 767.6 | 819.6 |  |
|||
| RX3 | 177.4 | 29.2 | 103.6 | 247.3 | ||||
2.6 正交试验综合结果的方差分析：以S最小者作为误差(Sc)，计算F。计算结果列于表4。 表4 方差分析表
| 方差来源 | 偏差平方和 | 自由度 | 均方 | Fee | 显著性 |
| A | 6 583.3 | 2 | 3 291.6 | 45.46 | * |
| C | 1 821.9 | 2 | 910.9 | 12.58 | |
| D | 11 336.9 | 2 | 5 668.4 | 78.29 | * |
| 误差 | 144.8 | 2 | 72.4 |
3 结论与讨论
结合各项指标，提取工艺选择为药材加6倍量70%乙醇回流提取3次，3 h/次。
图1 川芎薄层1-9号为正交试验样口 ,0号为川芎对照药材 作者简介：周勤文(1966-)，男(汉族)，南京人，现任南京同仁堂制药厂工程师，学士学位，从事中成药技术、质量及工艺的研究. 周勤文（南京同仁堂制药厂 210012）
孙晓芳（南京同仁堂制药厂 210012） 参考文献： ［1］ 贾晓斌，施亚芳，黄一平，等.当归和川芎中阿魏酸高效液相色谱测定方法的改进［J］.中成药，1998，20(6)∶37. 收稿日期：2000-04-10； 修订日期：2000-05-22文章中医中药网www.zhong-yao.net整理或转载,内容仅参考, 版权原作者所有, 转载请注明出处！
